Mikroorganismen produzieren sogenannte Siderophore (Eisenkomplexbildner), die es ihnen ermöglichen unter
Eisenmangelbedingungen zu existieren. Diese Fähigkeit wurde bei fakultativ pathogenen Enterobacteriaceen als ein
Virulenzfaktor erkannt. Unsere Untersuchungen sollen die biochemischen Grundlagen schaffen die Lysin N6-hydroxylase,
das erste Enzym der Siderophorbiosynthese, zu hemmen. Derartige Hemmstoffe k¿nnten ¿ber bakteriostatische
Wirkung verf¿gen. In den letzten Jahren ist uns die Reinigung und teilweise Charakterisierung der Lysin N6-hydroxylase
aus <I>E. coli</i> EN222 gelungen. Dieses FAD- und NADPH-abh¿ngige Enzym katalysiert die Hydroxylierung der terminalen
Aminogruppe von L-Lysin. Wir m¿chten den Reaktionsmechanismus dieser Hydroxylierung n¿her charakterisieren,
mittels R¿ntgenstrukturanalyse die dreidimensionale Struktur des Proteins aufkl¿ren und gegen das Aktivzentrum
gerichtete Hemmstoffe synthetisieren.
Microorganisms produce siderophores (strong iron ligands), which are required for their existence under limiting iron
conditions. For Enterobacteriaceae this has been recognized as a factor affecting virulence. The first enzyme in the
biosynthesis of siderophores is lysine N6-hydroxylase, a flavoprotein. A goal of our studies is to provide the biochemical
basis for the production of inhibitors of this enzyme. In the past years we have accomplished the purification and
partial characterisation of a lysine N6-hydroxylase from <I>E. coli</i> EN222. This enzyme requires FAD and NADPH as
cofactors. We currently investigate the mechanism of this hydroxylase and attempt its crystallisation for the resolution of
the three dimensional structure.
